这篇Analytical Chemistry文章发表于2024年12月；文章的第一作者为Junyang Chen，通讯作者为Wei Li，工作单位为郑州大学基础医学院。该研究通过针对FAP蛋白糖基化的适配体筛选策略，成功开发出一种基于双适配体的表面增强拉曼散射（SERS）免疫夹心测定法，实现了对FAP的高灵敏度和高选择性检测，为癌症诊断提供了一种新的、高效且具有临床应用潜力的检测方法。

样本设计概述

这篇论文的样本设计旨在验证所开发的双适配体基底等离子体免疫夹心测定法（odA-PISA）在实际临床应用中的有效性和可靠性。研究者选择了健康个体和癌症患者的血清样本进行检测，并通过标准添加法和与传统酶联免疫吸附测定（ELISA）的对比，进一步验证了该方法的准确性和实用性。

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样本来源：

健康个体血清样本：采集自健康志愿者的血清样本，用于评估背景信号和检测限。

癌症患者血清样本：采集自确诊的癌症患者的血清样本，用于验证该方法在实际临床样本中的应用能力。具体样本包括胆囊癌患者的血清样本

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样本处理：

预处理：血清样本在检测前无需复杂的预处理，直接用于检测，这体现了该方法操作简便的优势。

标准添加法：为了验证检测结果的准确性，研究者采用标准添加法，即在血清样本中加入已知浓度的FAP标准溶液，然后通过odA-PISA方法进行检测。通过比较添加前后Raman信号的变化，验证了该方法在复杂生物样本中的适用性。

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检测流程：

样本检测：将血清样本添加到适配体修饰的阵列上，经过孵育和洗涤步骤后，用适配体修饰的拉曼纳米标签进行标记，最后通过SERS技术读取信号。

数据处理：通过绘制Raman强度与FAP浓度的对数之间的线性关系，建立了校准曲线，用于定量分析血清样本中的FAP浓度。

图片详细解析

图4（D）：展示了胆囊癌患者血清样本中加入已知浓度FAP标准溶液后的Raman光谱图。图中显示了不同浓度（c1至c4分别为200、500、1000和1500 ng/mL）的FAP标准溶液在血清样本中的Raman信号。通过标准添加法，研究者能够观察到随着FAP浓度的增加，Raman信号强度显著增强，这表明odA-PISA方法能够准确检测血清样本中的FAP。该实验验证了该方法在复杂生物样本中的适用性和准确性。

图4（E）：展示了胆囊癌患者血清样本中FAP浓度的线性关系图。图中绘制了Raman强度与总FAP浓度（血清中初始浓度c0加上添加的浓度ci）的对数之间的线性关系。通过线性拟合，研究者发现Raman信号与FAP浓度之间存在良好的线性关系（y = −1250.96 + 941.16x，R² = 0.995），这进一步验证了odA-PISA方法在定量检测血清样本中FAP的可靠性。该实验结果表明，该方法可以用于实际临床样本的检测。

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